糖含量 DNS 法计算，先测吸光度，依标准
还原糖含量DNS法计算
原理
DNS法即3,5二硝基水杨酸比色法，在碱性条件下，还原糖与DNS试剂共热后，DNS被还原生成棕红色的3氨基5硝基水杨酸，在一定浓度范围内，其颜色的深浅与还原糖的含量成正比，通过在540nm波长处测定吸光度，再根据标准曲线计算出样品中还原糖的含量。
试剂配制
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葡萄糖标准溶液（1mg/mL）：准确称取干燥恒重的葡萄糖100mg，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100mL。
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DNS试剂：将6.3g DNS和262mL 2mol/L NaOH溶液，加到含有182g酒石酸钾钠的500mL热水溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸氢钠，搅拌溶解，冷却后定容到1000mL，贮于棕色瓶中。
标准曲线绘制
| 管号 | 葡萄糖标准液（mL） | 蒸馏水（mL） | DNS试剂（mL） | 葡萄糖含量（mg） |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0 | 1 | 5 | 0 |
| 1 | 2 | 8 | 5 | 2 |
| 2 | 4 | 6 | 5 | 4 |
| 3 | 6 | 4 | 5 | 6 |
| 4 | 8 | 2 | 5 | 8 |
| 5 | 0 | 0 | 5 | 0 |
将各管溶液混合均匀,沸水浴5min，冷却后加入4mL蒸馏水混匀，在540nm波长下测定吸光度，以葡萄糖含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
样品测定
取适量样品溶液（如发酵液稀释一定倍数后的溶液），加入DNS试剂，混匀后沸水浴5min，冷却后加入蒸馏水定容，在540nm波长下测定吸光度。
结果计算
根据样品的吸光度,在标准曲线上查得对应的还原糖含量（mg）。
还原糖含量（mg/mL）=从标准曲线查得的还原糖量（mg）÷样品体积（mL）×稀释倍数。
若想知道样品中还原糖的质量分数,可按以下公式计算：
还原糖质量分数（%）=(还原糖含量(mg)÷样品质量(g))×100%。
相关问题与解答
问题1：DNS试剂为什么要现用现配？
解答：DNS试剂不太稳定，长时间放置可能会导致其成分发生变化，影响与还原糖的反应效果及显色程度，从而影响测定结果的准确性，所以一般建议现用现配。
问题2：在DNS法中，为什么选择540nm波长进行比色测定？
解答：因为在碱性条件下，DNS与还原糖反应生成的棕红色物质3氨基5硝基水杨酸在540nm波长处有最大吸收峰，