S溶液可用丙三醇代替酒石酸钾钠,称取6.5g DNS溶于少量水,加入2mol/L的NaOH溶液325mL及丙三醇45g,定容至1000mL
是使用丙三醇配置DNS溶液的详细内容:
DNS溶液简介
DNS(3,5二硝基水杨酸)试剂是一种常用于测定还原糖含量的试剂,在碱性条件下,DNS与还原糖共热后被还原生成氨基化合物,在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色,在540nm波长处有最大吸收,在一定浓度范围内,还原糖的量与光吸收值呈线性关系,从而可以利用比色法测定样品中的含糖量。
丙三醇在DNS溶液中的作用
在DNS溶液的配置中,丙三醇可以代替苯酚,其作用主要是增加试剂的显色作用,使反应后的显色效果更明显,便于准确测定还原糖的含量。
丙三醇配置DNS溶液的具体步骤
(一)材料准备
- 药品:3,5二硝基水杨酸(DNS)、氢氧化钠(NaOH)、酒石酸钾钠、丙三醇、无水亚硫酸钠。
- 仪器:电子天平、水浴锅、磁力搅拌器、容量瓶、棕色瓶等。
(二)配置过程
- 称取DNS:准确称取一定量的DNS(具体重量根据所需配置的浓度和体积确定),放入烧杯中,加入约500ml蒸馏水,置于45℃水浴中,不断搅拌使其溶解。
- 加入氢氧化钠溶液:将适量的氢氧化钠配制成溶液,缓慢地逐滴加入到上述DNS溶液中,同时不断搅拌,在加入过程中,溶液温度会上升,要注意控制温度不要超过48℃,以免溶液颜色变黑,持续搅拌直到溶液清澈透明。
- 加入其他试剂:按照顺序依次逐步加入酒石酸钾钠、丙三醇和无水亚硫酸钠,酒石酸钾钠可提供稳定的碱性环境;丙三醇起到显色作用;无水亚硫酸钠可防止DNS被氧化。
- 继续水浴搅拌:继续保持45℃水浴,同时慢慢补加蒸馏水,不断搅拌,直到加入的物质完全溶解,这个过程需要有耐心,确保所有试剂充分溶解。
- 定容冷却:停止加热,待溶液冷却至室温后,用蒸馏水定容至所需体积。
- 过滤储存:用烧结玻璃漏斗过滤(过滤与否影响不大),将滤液储存在棕色瓶中,避光保存,室温下存放7天后可以使用,有效期一般为6个月。
注意事项
- 温度控制:在加入氢氧化钠溶液时,要缓慢加入并不断搅拌,严格控制温度不超过48℃,否则溶液容易变黑,影响试剂的使用效果。
- 试剂添加顺序:加入酒石酸钾钠、丙三醇和无水亚硫酸钠的顺序最好不要更改,以确保试剂的稳定性和反应效果。
- 搅拌充分:在整个配置过程中,尤其是加入各种试剂后,要充分搅拌,使试剂溶解均匀,避免出现局部浓度过高或未溶解的情况。
- 避光保存:配置好的DNS溶液应储存在棕色瓶中,避光保存,以防止试剂见光分解,影响测定结果。
相关问题与解答
(一)问题
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为什么用丙三醇代替苯酚配置DNS溶液后需要放置一周才能使用?
- 解答:用丙三醇代替苯酚配置的DNS溶液,其内部的化学反应需要一定的时间才能达到稳定状态,放置一周的目的是让试剂中的各种成分充分反应和相互作用,形成一个稳定的显色体系,以确保在测定还原糖时能够准确地显色和进行比色测定,如果在配置好后立即使用,可能由于反应不完全而导致测定结果不准确。
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如何判断配置的DNS溶液是否有效?
- 解答:可以从以下几个方面判断,观察溶液的颜色和外观,正常的DNS溶液应为黄色且澄清透明,若出现黑色或絮状沉淀等异常现象,说明配置过程可能出现了问题,溶液可能无效,可以通过对已知浓度的还原糖标准溶液进行测定,看测定结果是否在合理范围内,如果测定的标准曲线线性良好,且回收率接近100%,则说明配置的DNS溶液是有效的,还可以与之前配置的有效DNS溶液进行对比实验,观察测定